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southern biotech
細胞凋亡檢測試劑盒
10010-02 100TAnnexin V FITC細胞凋亡檢測試劑盒
Annexin V FITC細胞凋亡檢測試劑盒
品牌 | SouthernBiotech | 供貨周期 | 一個月 |
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應用領域 | 生物產業 |
細胞凋亡在許多細胞係統中是一種被充分證實的現象它在胚胎發生期間的組織和器官發育以及調節成體(ti) 組織的細胞更新中起關(guan) 鍵作用。在免疫係統中,凋亡提供了胸腺自身反應性T細胞2、生發中心低反應性B淋巴細胞3以及易受細胞毒性T淋巴細胞和自然殺傷(shang) 細胞攻擊的靶細胞的缺失機製。1,4在結構上,細胞凋亡的特征是染色質凝聚、細胞大小減小和核酸內(nei) 切酶將DNA切割成核小體(ti) 大小的片段。1,4,5除了這些細胞形態的變化發生在細胞凋亡過程中,細胞膜磷脂不對稱性的喪(sang) 失是一個(ge) 重要的事件,磷脂酰絲(si) 氨酸(PS)從(cong) 磷脂雙分子層的內(nei) 小葉轉移到細胞表麵雖然PS外化的功能尚不清楚,但它可能是吞噬細胞識別的“信號",吞噬細胞通過吞噬凋亡細胞作出反應。
在失去質膜完整性之前。暴露於(yu) 細胞表麵的PS為(wei) 檢測細胞凋亡提供了一種簡單的方法。膜聯蛋白V (Mr 36-kDa)是鈣依賴性磷脂結合蛋白膜聯蛋白家族的一員,對含ps的磷脂雙分子層具有高親(qin) 和力。當PS暴露在細胞膜的細胞外表麵時,膜聯蛋白V以大約7納米的親(qin) 和力結合膜聯蛋白V的熒光染料偶聯物可用於(yu) 監測細胞膜磷脂不對稱性的變化10-13,從(cong) 而提供了一種方便的工具。
由於(yu) PS外化發生的時間早於(yu) 與(yu) 凋亡相關(guan) 的細胞核變化,因此ApoScreen Annexin V凋亡試劑盒可用於(yu) 比基於(yu) dna的檢測更早地檢測凋亡途徑中的細胞標記膜聯蛋白V也可用於(yu) 分析膜的變化,行星和紅細胞的不對稱單個(ge) ApoScreen標記的膜聯蛋白V試劑見產(chan) 品號10040-02和10040-09。
試驗原理
ApoScreen Annexin V凋亡試劑盒采用r -植物紅蛋白標記的Annexin V (Annexin V- r - pe)7-AAD評估細胞凋亡亞(ya) 群。在細胞凋亡的早期階段,細胞開始在外細胞膜上顯示PS,通過膜聯蛋白V-R-PE染色細胞很容易檢測到PS。隨著在細胞凋亡的後期,質膜變得越來越通透,7-AAD可以很容易地穿過細胞膜並與(yu) 細胞DNA結合,為(wei) 識別那些通過壞死等機製失去膜完整性的細胞提供了一種手段。當細胞被膜聯蛋白V-R-PE和7-AAD雙重染色時,可以觀察到三種不同的細胞群(圖2):(i)活細胞不被膜聯蛋白VR-PE或7-AAD染色;(ii)兩(liang) 種試劑染色的壞死細胞;(iii)僅(jin) 膜聯蛋白V-R-PE染色的凋亡細胞。分析可以在任何配備單個(ge) 激光的流式細胞儀(yi) 上進行,激發波長為(wei) 488nm。
設備組件
1ml annexin V-R-PE:保存在2-8°C。按指示使用;無需預稀釋。
1 mL 7-AAD(100次):保存在2-8°C。按指示使用;無需預稀釋。避免皮膚接觸並妥善處理。
7 × 1.5 mL 10X結合緩衝(chong) 液:保存在2-8°C。使用前用9份dH20稀釋1份10X緩衝(chong) 液。