高濃度層粘連蛋白/巢蛋白混合物

BD 產(chan) 品貨號：354259

儲(chu) 存和運輸：-20度儲(chu) 存，幹冰運輸。

操作指南：

層粘連蛋白/巢蛋白混合物是EHS小鼠腫瘤基質膜的主要成分。純化後，成等摩爾濃度分布。二價(jia) 陽離子有利於(yu) 混合物的形成。在2mg/mL濃度時，層粘連蛋白/巢蛋白可以形成三維膠，可用於(yu) 細胞生長和分化的研究。三維膠更接近體(ti) 內(nei) 微環境。細胞的分化受到與(yu) 單一或混合細胞外基質蛋白之間的相互作用的影響，因此在層粘連蛋白/巢蛋白混合物上培養(yang) 細胞，可以用以觀察並揭示細胞分化和功能性的特性機理。混合蛋白的成膠過程對溫度敏感。此外，高濃度的層粘連蛋白/巢蛋白（2-6mg/mL）也用於(yu) 人下頜腺泡細胞和內(nei) 皮細胞的血管形成研究。

注意事項：

所有操作的工作溫度不能高於(yu) 4℃，蛋白需冰上操作保存，用冰塊冷卻的溶液或細胞懸浮液稀釋。由於(yu) 混合蛋白溶液粘性較高，必須使用預冷的注射器型移液管，如Gilson M係列；避免使用氣壓式移液管或吸頭。

推薦包被方法：

鋪膠步驟：細胞在膠表麵培養(yang)

冰上溶解混合蛋白，所有操作均在冰浴上進行。稀釋到需要的濃度：穩定成膠濃度至少為(wei) 3.5mg/mL。用預冷的等壓鹽溶液或0.1mM鈣離子培養(yang) 基稀釋。將稀釋的蛋白溶液加入到培養(yang) 器皿，1-2小時，37℃成膠。

鋪膠步驟：細胞在膠內(nei) 部培養(yang)

冰上溶解混合蛋白，所有操作均在冰浴上進行。根據加樣體(ti) 積計算並稀釋混合蛋白，成膠濃度至少為(wei) 3.5mg/mL，稀釋過程需在預冷的培養(yang) 器皿或小管中進行。加入預冷的細胞懸液，用等壓鹽溶液或培養(yang) 基調節溶液濃度到第二步所需的濃度。係列移液管混勻混合蛋白和細胞懸液。將混合後的細胞蛋白懸液加入到預冷的培養(yang) 板中，37℃孵育1-2小時成膠。