BD biocoat 基質膠和細胞檢測係統

BD biocoat 基質膠和細胞檢測係統

產(chan) 品貨號：354230  354234  356230  356231  356234  356235  356237      

儲(chu) 存和運輸：-20℃儲(chu) 存，幹冰運輸。

操作指南：

BD采用技術，從(cong) 富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基底膜基質，其主要成分由層粘連蛋白，IV型膠原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等組成，還包含生長因子和基質金屬蛋白酶等。BD Matrigel 基底膜基質在室溫條件下，聚合形成具有生物學活性的三維基質，模擬體(ti) 內(nei) 細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利於(yu) 體(ti) 外細胞的培養(yang) 和分化，以及對細胞形態、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。

BD Matrigel 基底膜基質形成的三維培養(yang) 機製，可促進上皮細胞、肝細胞、Sertoli細胞、黑色素瘤細胞、血管內(nei) 皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與(yu) 分化。同時，Matrigel 還能影響乳腺上皮細胞的蛋白表達，支持外周神經的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化，高濃度的Matrigel 適用於(yu) 研究體(ti) 內(nei) 血管生成和腫瘤細胞遷移及腫瘤模型的建立等。

Matrigel 基質會(hui) 有色差變化（淡黃色到深紅色），是由於(yu) 酚紅和碳酸氫鹽與(yu) CO2作用引起的。但是與(yu) 5%CO2平衡後色差即會(hui) 減少。凍融後，輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環境中進行。試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭，並自然幹燥。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表麵生長，也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內(nei) 生長。過度稀釋的Matrigel會(hui) 形成非膠質的蛋白層，也可以用於(yu) 細胞貼壁，但不能用於(yu) 細胞的分化研究。

注意：

1.可將凍融後的Matrigel分裝在多個(ge) 小管，所有分裝均需用預冷的凍存管，迅速冷凍並保存，避免多次凍融。

2.Matrigel在22-35℃溫度環境下快速成膠，因此溶解時在4℃冰上過一夜凍融（4℃時會(hui) 隨著溫度的上升部分成膠）。所有用品在使用前需置於(yu) 冰浴，必須使用預冷的移液管、吸頭及小管操作Matrigel。成膠後的Matrigel可以在4℃24-48小時後重新呈液態。

推薦包被與(yu) 成膠方法：

注意：為(wei) 了保證Matrigel基質膜的成膠性能與(yu) 穩定性，稀釋濃度不應低於(yu) 1:3，可用無血清培養(yang) 基稀釋，Matrigel成膠後立即使用。

薄膠成膠方法：

凍融後，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。

將需要使用的培養(yang) 板置於(yu) 冰上，加入濃度為(wei) 50ul/cm2生長麵積的Matrigel基質。

在37℃放置30分鍾，即可使用。

厚膠成膠方法：

凍融後，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。將需要使用的培養(yang) 板置於(yu) 冰浴，將培養(yang) 的細胞與(yu) Matrigel基質混合，用移液槍頭使其懸浮於(yu) 基質中。加入濃度為(wei) 150-200ul/cm2生長麵積的Matrigel基質。在37℃放置30分鍾，可成膠。可以加入細胞培養(yang) 的基質，可以是細胞直接生長在膠表麵。

薄層包被方法：

凍融後，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。根據使用需要，采用無血清培養(yang) 基稀釋Matrigel基質，根據實驗需要確定*包被濃度。將稀釋的Matrigel基質包被於(yu) 所需的培養(yang) 器皿中，包被量至少覆蓋整個(ge) 器皿的生長表麵。室溫下孵育1小時。去除未結合的Matrigel，用無血清培養(yang) 基輕輕地衝(chong) 洗。用BD細胞回收劑（354253）或離散酶（354235）可降解Matrigel基質，冰浴7小時候回收得到細胞。