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為什麽選擇ELISPOT?

更新時間:2013-06-13點擊次數:1459

ELISPOT斑點酶聯免疫分析使細胞因子分泌過程更加形象。因為(wei) 細胞因子圍繞在細胞周圍,在被上清液稀釋之前,會(hui) 和鄰近細胞表麵的受體(ti) 結合,或者降解。細胞因子和GranzemyB ELISPOT實驗是zui有效的體(ti) 外監控CD4或CD8T細胞抗原的方法。通過測定單個(ge) 細胞因子信號及其頻率,可以建立具有不同集落大小的特殊T細胞庫。

ELISPOT實驗檢測細胞因子的*優(you) 勢
 ☆從(cong) 1到10,000,000,可以測量體(ti) 外細胞因子的分泌頻率,和ELISA以及四聚體(ti) 染色、細胞內(nei) 細胞因子染色相比,具有靈敏度高、特異性好的特點。提高靈敏度非常關(guan) 鍵,因為(wei) 體(ti) 內(nei) 產(chan) 生抗原特異性T細胞的頻率非常低。

 

☆大批量細胞分析:可以分析上百個(ge) 樣品,檢測多種抗原。

☆所需細胞濃度低。和其他試驗方法相比,ELISPOT方法對細胞濃度沒有太高的要求,比如,檢測600中不同的抗原或肽段隻需要45ml血。

☆可以確定CD4或者CD8抗原決(jue) 定簇。因為(wei) 實驗所需細胞量少,實驗靈敏,所有ELISPOT對於(yu) 決(jue) 定簇圖譜的繪製,肽段文庫的篩選是的選擇。
☆可以建立抗原特異性T細胞親(qin) 和函數

☆可以研究未經藥物處理過的T細胞的實際細胞因子分泌過程,T細胞分泌物下降,則說明T細胞產(chan) 量減低或者單個(ge) 細胞分泌功能下降。

☆ELISPOT不破壞淋巴細胞活性,可以繼續進行細胞克隆以及低溫儲(chu) 藏研究
☆低溫存藏的人淋巴細胞可以繼續保持生物學活性,可以重複實驗步驟。

ELISPOT是現今研究T細胞功能,進行T細胞診斷zui有力的工具,ELISPOT的研究已經成為(wei) 一門科學。

ELISPOT分析儀(yi) 草案
在病理學教授Paul V. Lehmann博士帶領下,眾(zhong) 多學者共同在CWRU大學通過了新一代ELISPOT分析儀(yi) 的認證。 zui初ELISPOT是為(wei) 了檢測B細胞分泌抗體(ti) 而問世的,因為(wei) T細胞分泌細胞因子而B細胞產(chan) 生抗體(ti) ,新一代的ELISPOT增加了檢測T細胞分泌細胞因子的功能。

ELISPOT分析具有性、客觀性,可重複性以及自動化特點,改變了以往ELISA的耗時,結果不客觀的缺點。

ELISPOT分析儀(yi) 的出現解決(jue) 了以下問題
☆哪些斑點是抗原特異性T細胞產(chan) 生的(此斑點具有進一步分析價(jia) 值),哪些是無關(guan) 細胞產(chan) 生的(此斑點沒有T細胞研究價(jia) 值)
☆斑點大小的意義(yi)
☆在對不同細胞因子計數和分析時,如何定義(yi) 斑點zui大和zui小尺寸

☆如何從(cong) 單個(ge) 細胞基礎上分析

☆實驗度有多高?如果一個(ge) 細胞產(chan) 生相似的細胞因子,在多大程度上會(hui) 幹擾分析結果?

☆幾次重複實驗才能使結果更有意義(yi) ?

ELISPOT:世界*科學家辛勤勞動的果實
 

ELISPOT分析儀(yi) 的zui初研究在CWEU大學開始,由26名工作人員,15個(ge) 科研工作者,和許多來自BD、Pharmingen的科學工作者共同努力下研製成功的,為(wei) 此CTL也成為(wei) 美國國立衛生院免疫耐受網絡(ITN)的參考實驗室,專(zhuan) 門對各種ELISPOT臨(lin) 床試驗結果進行測試。

 

經科學認證的ELISPOT分析儀(yi) 包括三個(ge) 分析模式,適用於(yu) 客戶不同的消費水平、研究目的、外圍設備,附屬軟件和數據處理方法。另外,CTL提供圖像分析服務,ELISPOT有自己的網上實驗室,可以提供網絡培訓以及為(wei) 臨(lin) 床試驗項目按照合同約定提供研究服務。

EILISPOT:科學革命

自從(cong) CTL發起ELISPOT革命以來,很多人在借鑒我們(men) 的成功經驗。作為(wei) 創始人,CTL致力於(yu) 開創ELISPOT新方法並將其提高到科學的高度。