Chondrex Western blot封閉緩衝液(ChonBlock)

Chondrex Western blot封閉緩衝(chong) 液(ChonBlock)

背景簡介：

傳(chuan) 統的Western blot封閉緩衝(chong) 液（如含BSA、酪蛋白及NGS的配方）提供了一種經濟有效的方法來提升Western blot檢測的信噪比。盡管許多商品化封閉緩衝(chong) 液成本較高，但其封閉效果優(you) 於(yu) 傳(chuan) 統配方。ChonBlock作為(wei) 一種新型Western blot封閉緩衝(chong) 液，其性能與(yu) 其他商品化產(chan) 品相當，性價(jia) 比高。

產(chan) 品性能對比：

1.ChonBlock與(yu) 競品Western blot封閉緩衝(chong) 液的性能對比

 M:分子量Marker  CB: ChonBlock封閉液  A:競品A  B：競品B  C.競品C

   1(條帶)：HMGB1   2(條帶)：降解的HMGB1

   樣本：純化後的HMGB1細胞裂解液

   一抗：HMGB1抗體(ti) （cat#7032）

   二抗：goat anti-mouse IgG HRP (1:5000 dilution)

2.ChonBlock與(yu) 傳(chuan) 統Western blot封閉緩衝(chong) 液的性能對比

L:SP2/O細胞裂解液  P:純化後的HMGB1(Cat#9050)  M:分子量Marker

1(條帶)：HMGB1   2(條帶)：降解的HMGB1   BSA: 牛血清白蛋白  CRB:考馬斯亮藍

CB: ChonBlock封閉液 COMP:同競品牌WB封閉液

采用15%聚丙烯酰胺凝膠在還原條件下進行Western blot實驗，以比較三種不同緩衝(chong) 液體(ti) 係的性能。實驗使用小鼠抗HMGB1單克隆抗體(ti) （貨號#7032）作為(wei) 一抗（工作濃度1μg/ml），並以HRP標記的山羊抗小鼠IgG抗體(ti) 作為(wei) 二抗（稀釋比例1:4000）。

結果顯示：

1)BSA-Tween緩衝(chong) 液組因缺乏封閉效果，出現非特異性條帶拖尾現象；

2)競品緩衝(chong) 液雖能防止非特異性拖尾，但目標信號較弱且背景顯色較深；

3)使用ChonBlock緩衝(chong) 液的實驗組則觀察到清晰的HMGB1特異性條帶，且背景信號極低。

3.ChonBlock與(yu) 5% BSA-0.05% Tween 20對背景幹擾的的封閉效果對比

Western blot中的背景噪音（BG noise）主要由抗體(ti) 與(yu) 硝酸纖維素膜的非特異性疏水結合引起。為(wei) 評估ChonBlock與(yu) 傳(chuan) 統封閉緩衝(chong) 液（BSA-Tween）的性能差異，本研究將硝酸纖維素膜碎片分別用ChonBlock或BSA-Tween緩衝(chong) 液封閉後置於(yu) ELISA板中，與(yu) 一抗及二抗反應，並通過TMB顯色（ELISA法）後用酶標儀(yi) 定量測定各孔OD值。如圖所示，背景噪音的OD值與(yu) 抗體(ti) 濃度呈正相關(guan) （圖a & b），且二者協同作用會(hui) 進一步放大信號幹擾（圖c）。實驗證明，ChonBlock封閉液對背景噪音的抑製效果優(you) 於(yu) BSA封閉體(ti) 係。

產(chan) 品訂購：

注：請根據實驗體(ti) 係選擇PBS或TBS配方的ChonBlock。

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